1、安裝本儀器的實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)水平、穩(wěn)固、并具有足夠的放置空間。避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強(qiáng)磁場(chǎng)的地方安裝本儀器，否則將會(huì)影響儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)及縮短儀的使用壽命。

2、由于儀器所用溶劑是易燃并且有毒，故安裝設(shè)備的房間應(yīng)通風(fēng)良好，應(yīng)具有向外排風(fēng)的裝置，否則可能引起中毒或身體不適，也可能會(huì)引起火災(zāi)。

3、應(yīng)安裝四個(gè)以上三芯電源插座（220V，5~10A），必須具有專門的接地線（注意，絕不能將電源線的中線作為接地線），并確保輸出電源的電壓穩(wěn)定，否則會(huì)導(dǎo)致儀器的不正常運(yùn)作。如果實(shí)驗(yàn)室無(wú)接地線，一般可用φ15~20mm的銅棒打入地下1~1.5米，用φ1.2mm

左右的塑膠單股導(dǎo)線連接到電源插座的接地端。

4、如果實(shí)驗(yàn)室電壓不穩(wěn)定，應(yīng)使用穩(wěn)壓器等必要設(shè)備，使電源電壓穩(wěn)定。

5、實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)控制在15℃-30℃范圍內(nèi)，并且波動(dòng)要小；濕度在45~80%范圍內(nèi)。

6、由空調(diào)或其他設(shè)備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器，避免光線直射及振動(dòng)。

儀器的啟動(dòng)順序：先開高壓恒流泵和紫外檢測(cè)器，待紫外檢測(cè)器自檢完畢，回到默認(rèn)波長(zhǎng)254nm后，再開計(jì)算機(jī)及打開工作站軟件。

儀器關(guān)閉順序：先按泵停止，關(guān)閉氘燈，退出工作站軟件，然后再關(guān)儀器。

儀器應(yīng)由專人負(fù)責(zé)，如果使用人員不固定，請(qǐng)準(zhǔn)備《儀器使用登記本》，以明確使用情況，及時(shí)處理和保養(yǎng)。

二、流動(dòng)相使用的注意事項(xiàng)

必須使用HPLC級(jí)或相當(dāng)于該級(jí)別的流動(dòng)相，并要先經(jīng)0.45µm薄膜過濾。

過濾后的流動(dòng)相必須經(jīng)過充分脫氣，以除去其中溶解的氣體（如02），如不脫氣易產(chǎn)生氣泡，增加基線噪聲，造成靈敏度下降，甚至無(wú)法分析。

幾種脫氣方法比較：

1）氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好但成本高。

2）加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染。

3）抽真空脫氣法：易抽走有機(jī)相

4）超聲脫氣法：一種較為常見的脫氣法。流動(dòng)相放在超聲波容器中，用超聲波震蕩10~15分鐘，此法效果并不太好但操作簡(jiǎn)單。

如果管路中使用peek樹脂部件，請(qǐng)不要使用下列流動(dòng)相：

濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、*、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜

特別注意HPLC使用過后的系統(tǒng)清洗：

含有緩沖鹽溶液的流動(dòng)相的清洗方法：

1）先用100%的純水沖洗，打開排放閥，用3~5ml/min的流量，洗二十分鐘左右后停泵。此舉主要是針對(duì)吸液系統(tǒng)、泵頭、進(jìn)出口單向閥等體積較大的空間的清洗

2）再用95：5的甲醇/水清洗整個(gè)系統(tǒng)，關(guān)閉排放閥，用1ml/min的流量，洗30~60分鐘后停泵。此舉主要是用水清洗整個(gè)系統(tǒng)中的鹽，用5%的甲醇主要是為了保護(hù)色譜柱。

3）zui后用100%的甲醇清洗整個(gè)系統(tǒng)，用1ml/min的流量，洗2分鐘左右，然后關(guān)機(jī)。如果流動(dòng)相中不含鹽，則使用上述第三步清洗即可。

三、流動(dòng)相的更換

在分析過程中，有時(shí)需要更換流動(dòng)相進(jìn)行分析。一定要注意前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相是不是能夠相溶。如果前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相不能夠相溶，那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動(dòng)相都能相溶的流動(dòng)相進(jìn)行過濾、清洗。較為常用的過濾流動(dòng)相為異丙醇，但實(shí)際操作中要看具體情況而定，原則就是采用與這二種需更換的流動(dòng)相都能相溶的流動(dòng)相。一般清洗時(shí)間為30~40分鐘，直至系統(tǒng)*穩(wěn)定。如不進(jìn)行以上“特別注意”上述步驟的操作，將會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)管路阻塞。嚴(yán)重時(shí)將引起流通池污染堵塞，不得不更換流通池。用戶就要承擔(dān)不必要的損失了。

四、儲(chǔ)液器的注意事項(xiàng)：

保持流動(dòng)相儲(chǔ)液器的清潔是保證儀器正常使用的關(guān)鍵。要使用HPLC級(jí)的溶劑，對(duì)試劑含有緩沖鹽及非HPLC級(jí)的流動(dòng)相一定要用0.45µm過濾器除區(qū)去其中的微量物質(zhì)。

五、管路連接的注意事項(xiàng)

1、將管子*插入開口端，直至其與開口端的末端相碰為止。否則將產(chǎn)生死體積，引起峰展寬。

2、為了使柱外效應(yīng)減到zui小，獲得理想的分析結(jié)果，盡量使用管徑細(xì)的管路作為連接。

3、管路接頭不要擰得過緊，以防破壞螺紋。

六、復(fù)力氘燈的保養(yǎng)

紫外檢測(cè)器中的氘燈是有一定使用壽命的。為了節(jié)省燈的使用壽命，在暫時(shí)不使用時(shí)可在不關(guān)機(jī)的情況下，只把燈關(guān)掉（建議：在需要關(guān)燈4小時(shí)以上才關(guān)燈，因?yàn)轭l繁的開關(guān)燈，同樣會(huì)縮短燈的使用壽命）。

七、色譜柱的保養(yǎng)事項(xiàng)

為了保護(hù)色譜柱，延長(zhǎng)其使用壽命，在使用時(shí)應(yīng)采取以下幾方面措施：應(yīng)在柱頭加燒結(jié)片不銹鋼濾片，需要時(shí)加保護(hù)柱。防止柱頭堵塞，影響分析效果。當(dāng)流動(dòng)相的PH>7時(shí),要用大粒度同種填料作預(yù)柱。溶劑的化學(xué)腐蝕性不能太強(qiáng)。要避免微粒在柱頭沉降。為防止高壓沖擊，泵上的壓力限制不宜太高，一般在15~20MPa為宜，在舊柱或梯度洗脫時(shí)應(yīng)稍高些，以避免因上限設(shè)置過低而造成正常使用中的中途停機(jī)。色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用，存放時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑（甲醇或乙腈），兩端封死。

八、手動(dòng)進(jìn)樣閥不的維護(hù)注意事項(xiàng)

在每次使用后，尤其是進(jìn)樣濃度差異比較大的樣品時(shí)要用工具（不是帶針頭的注射器）沖洗進(jìn)樣閥，沖洗時(shí)必須沖洗進(jìn)樣閥兩頭數(shù)次，每次數(shù)毫升。以防止無(wú)機(jī)鹽沉積和樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。

安裝進(jìn)樣閥的5，6出口要與注射器在同一水平線上，以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生，導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異。

進(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量管的環(huán)體積決定：當(dāng)樣品量較少時(shí)：進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定，但zui大體積要小于環(huán)體積的1/2。當(dāng)樣品量較多時(shí)：進(jìn)樣體積由定量管的體積決定，為保證樣品*把定量管的流動(dòng)相置換干凈，需注射5-6倍的環(huán)體積。

要使用的液相注射器進(jìn)樣，絕不可用氣相注射器。注射器前應(yīng)用的樣品過濾器。

九、高壓恒流泵的維護(hù)注意事項(xiàng)

泵的密封圈是zui易磨損的部件，密封圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障，要注意保養(yǎng)和定期更換。應(yīng)采取下列措施以延長(zhǎng)使用壽命：

不允許在沒有流動(dòng)相的或流動(dòng)相還沒有進(jìn)入泵頭的情況下啟動(dòng)泵而造成柱塞桿的干磨。

每天使用后應(yīng)將整個(gè)系統(tǒng)管路中的緩沖液體沖洗干凈，防止鹽沉積，整個(gè)管路要浸在無(wú)緩沖的溶液或有機(jī)溶劑中。長(zhǎng)期不用也要定期開泵沖洗整個(gè)管路。要用HPLC級(jí)試劑輸液管前端要用燒結(jié)不銹鋼沉子過濾流動(dòng)相。要注意防止管路阻塞造成壓力過高而損壞儀器。

壓力下限應(yīng)設(shè)置在0.5~1MPa，以防止儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被抽干或嚴(yán)重滲漏而引起柱塞的干磨有柱后清洗功能的高壓恒流泵還要注意保持清洗液，否則將失去柱后清洗效果。

十、泵的壓力不穩(wěn)定

在安裝調(diào)試時(shí)以及在日常使用過程中，若出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的現(xiàn)象。原因有幾點(diǎn)：

（一）、管路里有氣泡，建議由流動(dòng)相多走些時(shí)間?；虼蜷_排空閥，用配件里的針筒多抽幾下。

（二）、輸入單向閥失效所致，這也是經(jīng)常遇見的。首先如何判斷輸入單向閥失效。

判斷步驟為：

如果是雙泵梯度分析系統(tǒng)，故泵壓力不穩(wěn)必然是其中一臺(tái)泵壓力不穩(wěn)所致，須逐個(gè)分析。

1、在不開UV檢測(cè)器，工作站的前提下，將其中一臺(tái)泵接上蒸餾水作為流動(dòng)相。

2、打開排空閥，用針筒抽出些流動(dòng)相，確認(rèn)泵中已有該流動(dòng)相，然后將針筒內(nèi)的液體排出，并重新接在排空閥上。

3、按“設(shè)置”鍵直至出現(xiàn)“沖洗”字樣，選擇是，并啟動(dòng)沖洗功能。流量5ml/min時(shí)間5min（注意：此時(shí)排空閥仍要打開，否則將沖壞色譜柱）

4、沖洗完畢后。查看針筒內(nèi)流動(dòng)相體積是否為20ml（5×5=25），若正確，則說明該泵在低壓情況下*；若不正確，則說明該泵中某一單向閥失效（一般為輸入單向閥）。

5、用同樣的方法測(cè)試另外一泵。等度只要測(cè)試一臺(tái)就可以了。

造成單向閥失效的原因有幾點(diǎn)：

①液相色譜從成品到客戶手中有一段時(shí)間，出廠前每臺(tái)儀器都要經(jīng)過調(diào)試，一段時(shí)間內(nèi)不會(huì)造成內(nèi)部殘留流動(dòng)相與寶石球粘連的情況?？蛻糸L(zhǎng)期不用也會(huì)造成類似情況，建議客戶在長(zhǎng)期不使用情況下，每周用甲醇作為流動(dòng)相，開機(jī)1小時(shí)使管路充滿液體。

②流動(dòng)相內(nèi)雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。雖然有的客戶認(rèn)為流動(dòng)相已過濾了。但長(zhǎng)期使用后，由于液相色譜是微量分析儀器，難免會(huì)產(chǎn)生類似情況。這是液相色譜的普遍現(xiàn)象，國(guó)內(nèi)外的泵只要是被動(dòng)單向閥，都會(huì)有類似現(xiàn)象發(fā)生，這并不是儀器的質(zhì)量問題。而是日常維護(hù)的一部分?，F(xiàn)在介紹一個(gè)簡(jiǎn)單而有效的單向閥失效的處理辦法。

單向閥失效處理辦法：

①擰下2個(gè)單向閥（一個(gè)為進(jìn)口，另一個(gè)為出口）

②將2個(gè)單向閥擰上清洗用四氟特殊螺帽（在儀器附件中），放入超聲波清洗器，先用異丙醇清洗10分鐘，再用清水清洗10分鐘，擰上四氟特殊螺帽主要是防止清洗時(shí)單向閥被散開。

③完畢后，將2個(gè)單向閥裝回原位即可。（注意單向閥必須擰緊）

若兩個(gè)泵在低壓狀態(tài)下流量都正確，則建議分別將兩泵連接上色譜柱進(jìn)行高壓測(cè)試。

高壓測(cè)試具體 操作方法：

①在雙泵分析系統(tǒng)連接的前提下，只須先打開其中一泵（確認(rèn)接好流動(dòng)相）

②設(shè)置流量1ml/min

③啟動(dòng)泵

④觀察運(yùn)行期間，泵的壓力是否穩(wěn)定。若穩(wěn)定，說明泵無(wú)問題；若泵壓力不穩(wěn)，則應(yīng)檢查各管路接頭有無(wú)泄露，并將有泄露的接頭擰緊：若無(wú)泄露，則問題可能還是出在單向閥上，須再次沖單向閥，反復(fù)實(shí)驗(yàn)。（注：不必打開UV檢測(cè)器及工作站）

⑤重復(fù)上述步驟，對(duì)另一臺(tái)泵進(jìn)行高壓測(cè)試

如還出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的情況，有可能密封圈受損，建議更換。

十一、紫外檢測(cè)器的維護(hù)注意事項(xiàng)

要保持檢測(cè)器中的流通池清潔，每天用后注意沖洗真整個(gè)管路。要定期用強(qiáng)溶劑反向沖洗流通池（斷開柱），以清洗流通池。流動(dòng)相要脫氣，防止氣泡滯留在流通池內(nèi)，影響分析效果。